Descripción del Protocolo
NotaPasos
- Eutanasiar a los ratones (BALB/C o C57BL6) mediante dislocación cervical.
- Perfundir los pulmones con PBS 1X, removerlos y colocarlos en PBS 1X / SFB (5%).
- Disgregar el tejido con RPMI, SFB al 2%, colagenasa (1mg/ml) y DNasa I (1mg/ml).
- Mantener en agitación a 250 rpm por 11 minutos a 37°C.
- Pasar las células por una membrana de nylon de 40-70\(\mu\)m de diámetro, recolectar y lavar con PBS1X.
- Eliminar los eritrocitos con solución de lisis eritrocitario por 5 minutos/37°C.
- Lavar las células con PBS1X 1500 RPM /4°C / 5 minutos y resuspender las células en PBS1x (2ml; frio).
Diagrama de Flujo
