congelar células

Descripción del Protocolo

NotaPasos

• Cosechar las células¹ y resuspender en 5ml de medio de cultivo.

• Centrifugar a 1500rpm/5 minutos/4ºC.

• Remover el sobrenadante y añadir 1 ml de medio crioprotector².

• Resuspender las células y pasar inmediatamente a hielo.

• Guardar a -80°C/24 hrs y posteriormente almacenar en nitrógeno líquido.

Diagrama de Flujo

Figura

Anexos

Soluciones

Medio crioprotector

Reactivo	Volúmen	Concentración
SFB3	45ml	90%
DMSO4	5ml	10%

Documentos de ?@sec-ref

actualizaciones

versión		Elaboró	Revisó
2023.04	inicial	Oscar Medina Contreras	Oscar Medina Contreras
2024.01	actualización	Oscar Medina Contreras	Oscar Medina Contreras
2025.01	actualización	Oscar Medina Contreras	Oscar Medina Contreras

Notas

Notas

1. Partir de células con una confluencia del 80-90%

2. Congelar a una concentración de 10⁶-10⁷ células/ml

3. suero fetal bovino

4. dimethylsulfoxido